臨床實驗方案范文

　　為確保事情或工作順利開展，通常會被要求事先制定方案，方案的內(nèi)容和形式都要圍繞著主題來展開，最終達到預(yù)期的效果和意義。優(yōu)秀的方案都具備一些什么特點呢？下面是小編為大家收集的臨床實驗方案范文，僅供參考，大家一起來看看吧。

　　[Abstract] Objective To study the cognition of improvement of human glioma reactive biological characteristics by the BT325 cell line tumor tessellation radiation scheme and provide experimental basis for the clinical diagnosis and treatment. Methods 100 rats were selected and divided into two groups with 50 cases in each，the BT325 cell-line nude mice transplantable tumors were given different doses of radiation，5 times a week in 2 Gy，3 times a week in 3 Gy，5 times a week in 3 Gy，3 times a week in 4 Gy，and the dose efficacy correlation was evaluated by the tumor growth carve，and the tumor volume doubling time was measured. Results The difference in the tumor retrogression rate between the single radiation treatment plan and fractional irradiation treatment plan was not obvious without statistical significance（4.0% vs 7.5%）（P>0.05），and the nude mice transplantable tumors obviously decreased after adding the fractional dose，and the tumor retrogression rate after the 5 tinnes a weeb in 3 Gy and 3 times a week in 4 Gy radiation treatment was respectively 40.0% and 70.0%，and the difference was obvious with statistical significance（P

　　[Key words] Malignant brain neurogliocytoma；Tumor tessellation radiation treatment；Mechanism；Experiment

　　近百年來，放射科學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展產(chǎn)生了巨大的變化，同時也推動了有關(guān)腫瘤放射治療的理論和研究的提出，其在腫瘤干細胞中放射治療中的關(guān)系仍然具有十分重要的影響。近年來，放療快速發(fā)展，已進入精確放療階段。目前，國內(nèi)外放射生物學(xué)研究的重點大都放在了生物學(xué)特點與現(xiàn)代放療技術(shù)的結(jié)合上，旨在提高腫瘤放療的治療效果[1]。針對腦惡性膠質(zhì)瘤的治療，手術(shù)治療聯(lián)合術(shù)后放射治療的目前臨床公認的有效的治療。國內(nèi)外的研究學(xué)者在放射方案設(shè)計及方案改進方面進行了許多的探索和研究[2]。為了給臨床提供有價值的實驗依據(jù)，該研究回顧性了不同分割照射人腦膠質(zhì)瘤裸小鼠（100只）移植瘤劑量效應(yīng)的關(guān)系，提高對人腦膠質(zhì)瘤放射反應(yīng)特點的認知，現(xiàn)報道如下。

　　1 Y料與方法

　　1.1一般資料

　　建立BT325細胞系培養(yǎng)及裸小鼠移植瘤模型，培養(yǎng)基用10%胎牛血清RPMI-1640培養(yǎng)，并取指數(shù)生長期細胞實驗。BT325細胞裸小鼠移植瘤模型由本實驗室與動物室聯(lián)合建立，其穩(wěn)定性傳代8代以上。使用18～20 g BALB-c-nu裸小鼠；在其裸小鼠右后腿接種于腫瘤，生長長度1 cm后行照射治療。

　　1.2照射方法

　　用瓦里安600直加速器6 MVX射線照射治療，劑量率為2.5 Gy/min。裸小鼠在有機玻璃容器內(nèi)，在其清醒時進行照射；貼壁生長BT325細胞照射時細胞面上；源皮距離100 cm。在正常空氣條件下對各組進行照射治療。

　　1.3實驗方法

　�、賹�實驗分為兩組，單次照射劑量10、20、30、40 Gy及60 Gy；分次照射組，2 Gy 1周5次、3Gy1周3次治療。在照射治療期間，用游標卡尺測量腫瘤基地最大徑，并繪制實驗組腫瘤生長曲線。②測定BT325細胞生物學(xué)參數(shù)：取指數(shù)生長細胞實驗，采用細胞生長曲線計算細胞倍增時間；繪制細胞存活曲線采用細胞克隆形成分析法，并擬合曲線，將曲線參數(shù)導(dǎo)出。

　　1.4觀察指標

　　比較兩組腫瘤細胞、腫瘤體積倍增時間，及細胞存活曲線參數(shù)值、5 Gy照射誘導(dǎo)腦膠質(zhì)瘤細胞DNA單鏈斷裂半值修復(fù)時間（T1/2）[3-4]。

　　1.5統(tǒng)計方法

　　該研究所得數(shù)據(jù)均采用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析處理，計量資料用均數(shù)±標準差（x±s）表示，并采用t檢驗，計數(shù)資料采用[n（%）]表示，采用χ2檢驗，以P

　　2結(jié)果

　　2.1兩組BT325細胞裸小鼠移植瘤照射劑量效應(yīng)關(guān)系

　　單次照射治療方案腫瘤消退率僅為4.0%，與分次照射治療方案后腫瘤消退率7.5%比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。兩種照射治療方案均未能明顯縮小腫瘤，且照射結(jié)束后腫瘤出現(xiàn)再生長，治療效果不理想。單次照射方案結(jié)果具體見圖1，分次治療結(jié)果具體見圖2。

　　增加分次劑量后，裸小鼠移植瘤明顯縮小，其中，3 Gy 1周5次照射、4 Gy 1周3次照射治療腫瘤消退率分別為40.0%、70.0%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P

　　2.2 BT325細胞生物學(xué)參數(shù)測定結(jié)果

　　根據(jù)細胞生長曲線，計算出了BT325細胞倍增時間為30.2 h。同時，按照腫瘤生長曲線計算測出，BT325細胞裸小鼠移植瘤體積倍增時間為43.2 h。

　　3討論

　　腦膠質(zhì)瘤是臨床常見病，同時也是常見的惡性腦原發(fā)腫瘤，根據(jù)其WHO分級，手術(shù)作為臨床首選的治療方法，同時以手術(shù)治療聯(lián)合術(shù)后輔助放化療作為有效提高腦膠質(zhì)瘤患者生存期的重要治療手段。但是從臨床實際來看，分級較低的腦膠質(zhì)瘤患者具有較好的臨床治療效果，且具有較長的總生存期，而分級較高患者的生存期只能用月份來進行描述，其治療的總體效果并不理想，而經(jīng)分析，惡性腦膠質(zhì)瘤治療不理想的原因在于局部復(fù)發(fā)[5]。而局部復(fù)發(fā)的根源主要為在治療結(jié)束后，患者體內(nèi)的腫瘤干細胞未能被全部殺滅。而亞臨床病灶中殘存的腫瘤干細胞會快速發(fā)生再群體化，從而導(dǎo)致患者在治療結(jié)束后的一段時間內(nèi)出現(xiàn)復(fù)發(fā)的腫瘤。腦組織的結(jié)構(gòu)及功能較為復(fù)雜，并且術(shù)后并發(fā)癥具有高危性，這就給腫瘤復(fù)發(fā)后進行再次治療帶來了較高的難度和風險性。因此，術(shù)后初次的放療方案的選擇和優(yōu)化是影響患者預(yù)后的關(guān)鍵因素。在國際方面，許多臨床專家對腦膠質(zhì)瘤照射野和總劑量做了多年的探索和研究，不過也并未取得完全一致的結(jié)論，單次不同劑量照射治療、分次治療均不能明顯縮小腫瘤[6]。該研究的結(jié)果顯示：單次照射治療方案腫瘤消退率僅為4.0%，與分次照射治療方案后腫瘤消退率7.5%差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。兩種照射治療方案均未能明顯縮小腫瘤，且照射結(jié)束后腫瘤出現(xiàn)再生長，治療效果不理想，與相關(guān)研究結(jié)論具有一致性，其中蓋雪等人[6]研究結(jié)果為，單次照射各劑量點均不能有效控制腫瘤，2 Gy 5次/周和3 Gy3次/周治療方案對人腦膠質(zhì)瘤實體瘤也無明顯治療效果.增加分次劑量可使腦膠質(zhì)瘤實體腫瘤有較明顯的消退，其中4 Gy 3次/周方案好于其他方案但仍未能達到治愈腫瘤的效果.表明對腫瘤干細胞的控制不理想.各項生物學(xué)參數(shù)的測定結(jié)果：BT325細胞倍增時間為30.16 h，裸小鼠移植瘤腫瘤倍增時間為43 d；細胞存活曲線LQ模型擬合的α=0.360 Gy-1、β=0.057 Gy-2，多靶單擊模型擬合的D0=1.394 Gy、Dq=2.127 Gy、SF2=0.714；5 Gy照射DNA單鏈斷裂的T1/2=9.999 min。

　　而在常規(guī)治療模式下，總劑量雖然達到了標準劑量，但是照射治療后腫瘤并未明顯縮小，并且會短時間內(nèi)快速再生長，提示常規(guī)分割照射治療方案對腫瘤干細胞或增值態(tài)腫瘤細胞的殺滅作用并不理想[7]。而在逐步增加分次照射劑量后，分次照射劑量提高至3 Gy時，每周3次照射治療，則腫瘤會逐漸消退；在把分割照射治療劑量提升至4 Gy時，則腫瘤消退很明顯，說明分割增加劑量照射治療的近期效果理想，不過18周后腫瘤明顯再生政。

　　根據(jù)該研究離體培養(yǎng)BT325細胞生長與放射生物參數(shù)計算結(jié)果，BT325細胞倍增時間、裸小鼠移植瘤腫瘤體積倍增時間分別為30.2、43.2 h，提示腦膠質(zhì)瘤細胞的細胞、腫瘤體積倍增時間均明顯長于腺癌、鱗癌。

　　按照相關(guān)文獻研究結(jié)論，影響實體腫瘤與細胞放射敏感性的因素較多，比如單位體積腫瘤中克隆源細胞含量、放射敏感性、克隆源細胞繁殖活性及代謝狀態(tài)等因素。該研究通過對裸小鼠移植瘤分割照射治療實驗，證實了腦膠質(zhì)瘤屬于一種放射抗拒性較高的腫瘤，與相關(guān)研究看法具有一致性[8]。同時，該研究的結(jié)果也顯示，如果患者腦膠質(zhì)瘤實體瘤體積較大，則不管是采用分割照射治療方案，即便是總劑量較高，僅僅給予單純治療，也無法有效控制腫瘤。因此可以看出，目前對于惡性腦膠質(zhì)瘤亞臨床分瘤給予手術(shù)治療、術(shù)后輔助放療或化療治療的方案具有一定的科學(xué)性和合理性，屬于一種綜合性和延續(xù)性的治療方案，近期治療控制的效果理想。

　　綜上所述，惡性腦膠質(zhì)瘤為一種臨床診療難度較大的惡性腫瘤，該研究在對其亞臨床腫瘤適宜分割照射治療方案進行對照研究的基礎(chǔ)上，認為單次劑量照射治療、分次劑量照射治療的效果均不理想，而增加分次照射劑量近期療效尚可，但無法有效控制腫瘤干細胞，尚需進一步研究討論。

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